BR1020240149637

Processos para a produção em escala piloto da proteína sintética LbK39 transfectada em L. tarentolae transfectada foram sistematicamente otimizados. Foi determinada a taxa de inóculo ideal (6–8 x 10⁷ células/mL) em uma proporção de 1:10 com o meio de cultura, temperatura de incubação ideal de 26°C. Meio contendo Infuso de Cérebro-Coração (BHI) adicionado de 5% de hemina e solução de PEG 8000, resultou em um aumento significativo de 38,7% na produção da proteína Lbk39. A otimização de parâmetros de cultura em biorreatores agitados mostrou que, usando impelidores do tipo hélice, a adição de 5 mg/L de solução de hemina e agitação a 50 rpm reduziram o estresse celular e aumentaram a produção da proteína Lbk39 em 27,87% em comparação com a produção com parâmetros padrão. A taxa fixa de oxigênio dissolvido de 30%, manteve o rendimento de produção de proteína em escala de bancada (7,56 µg/mL). Testes de estabilidade demonstraram que a proteína recombinante Lbk39 é mais estável em seu formato sólido, mantendo suas características físico-químicas e biológicas quando armazenada a temperaturas superiores à temperatura ambiente por seis meses. Esses parâmetros prometem uma produção eficiente de Lbk39, facilitando avanços no diagnóstico e manejo da leishmaniose.