Identificação das redes regulatórias mediadas pelo receptor associado à resistência ao tratamento com Tamoxifeno (EphA2), em câncer de mama

O câncer de mama é o tipo de neoplasia mais incidente no mundo, representando 11,7% de todos os casos de câncer. De acordo com o Instituto Nacional do Câncer (INCA, 2020), foram esperados para o ano de 2020 o diagnóstico de 66.280 casos de câncer de mama no Brasil. O crescente número de casos diagnosticados desta neoplasia ao longo dos anos caracteriza o câncer de mama como um problema de saúde pública global, que exige a superação de barreiras sociais, econômicas e psicológicas. Ampliar os conhecimentos sobre sua etiologia, desenvolver alternativas de tratamento e novos métodos de diagnóstico precoce são prioridades na oncologia. Levando em conta a heterogeneidade do câncer de mama, são utilizadas na prática clínica ferramentas que possibilitam maior precisão no diagnóstico da doença, sendo assim, possível classificá-la em quatro subtipos (luminal A, luminal B, triplo-negativo e HER2- positivo) que apresentam condutas terapêuticas e determinação de prognóstico diferentes. Independente do subtipo a ser considerado, um problema bastante incidente em pacientes com câncer de mama é a aquisição de resistência ao tratamento, este podendo ser, sistêmico ou terapia-alvo. Diversos mecanismos moleculares já são conhecidos no processo de aquisição de resistência, entretanto, um gene que merece destaque neste contexto, denominado EphA2 ainda é pouco explorado. Este gene codifica um receptor do tipo tirosina quinase e é conhecido por participar de diversos processos celulares como migração, adesão e diferenciação. No câncer de mama, este gene encontra-se mais expresso, em relação ao tecido normal adjacente, e evidências demonstram que sua expressão se encontra aumentada em pacientes com resistência ao tratamento com as drogas tamoxifeno e trastuzumab, usadas como terapias-alvo para os subtipos luminal A/B e HER2-positivo, respectivamente. Ressaltasse aqui, que pouco se sabe sobre as vias regulatórias desreguladas por este receptor durante o processo de aquisição de resistência. Sendo assim, destacada a relevância clínica do receptor EphA2 no câncer de mama, um trabalho anterior do nosso grupo, desenvolveu uma linhagem celular editada para perda de função deste gene. Foi utilizada a linhagem MCF-7, representante do subtipo luminal A, o mais frequente entre os subtipos da doença, e o sistema CRISPR/Cas9 como ferramenta de edição do gene EphA2. Esta linhagem celular, foi encaminhada para análise do perfil transcriptômico utilizando-se a metodologia de RNA-Seq. Com estes dados, comparativamente a linhagem MCF-7 selvagem (WT), espera-se encontrar genes e vias desreguladas em decorrência da perda de função do gene EphA2. Vários inibidores de EphA2 têm sido propostos para o controle da tumorigênese e existem alguns ensaios clínicos em andamento explorando anticorpos, siRNA e outras classes de inibidores de EphA2. Contudo, o amplo espectro de ação deste receptor tirosina-quinase, pode comprometer o uso de inibidores devido à respostas adversas sistêmicas. Com nossos dados, poderemos explorar de forma detalhada os mecanismos moleculares subjacentes à ação de EphA2, na busca candidatos a estratégias terapêuticas auxiliares no tratamento do câncer de mama, que envolvam a inibição de genes da via do EphA2, com menor potencial de efeitos em outras funções celulares. Pretende-se também avaliar estas redes de regulação e respostas celulares sob ação da droga.